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貨號(hào):HBKP7025-2

保質(zhì)期:三年

用途:用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含葡萄糖、酚紅；不含精氨酸）

用途:用于支原體的分離培養(yǎng)。

支原體簡(jiǎn)介

支原體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，缺乏細(xì)胞壁，僅有質(zhì)膜，胞體內(nèi)有核蛋白體以及一個(gè)由環(huán)形雙鏈DNA分子組成的原核。大小僅有0.1~0.3μm，最小直徑約為100毫微米，可通過(guò)濾菌器，會(huì)干擾細(xì)胞培養(yǎng)等工作的進(jìn)行。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。

不同支原體利用的能源物質(zhì)不同，如發(fā)酵葡萄糖的肺炎支原體、人型支原體等，水解精氨酸的口腔支原體等，還有利用尿素作為能源的解脲支原體。可利用發(fā)酵葡萄糖、水解精氨酸、水解尿素等生化反應(yīng)鑒別支原體。

支原體營(yíng)養(yǎng)要求一般比細(xì)菌高，除必須的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加10%~20%的動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇。由于大多數(shù)的支原體兼性厭氧，有些菌株在活化分離時(shí)保持5%~10%二氧化碳環(huán)境生長(zhǎng)狀態(tài)更好。解脲支原體在厭氧條件下生長(zhǎng)更好。

支原體無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)滲透壓敏感，對(duì)抑制細(xì)胞壁合成的抗生素不敏感，因此可添加青霉素抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。由于滲透壓突變會(huì)導(dǎo)致支原體破裂死亡，因此培養(yǎng)支原體時(shí)，維持適宜的滲透壓顯得格外重要。此外，在支原體培養(yǎng)中，pH也是重要因素。

肺炎支原體檢驗(yàn)依據(jù)及培養(yǎng)基原理

支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》中體現(xiàn)，要求使用支原體肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)監(jiān)測(cè)肺炎支原體。具體操作要求為：將肺炎支原體稀釋至10-7~10-9，接種在支原體肉湯培養(yǎng)基中，每個(gè)稀釋度接種3支試管，置于36℃培養(yǎng)7-14天，觀察培養(yǎng)基變色結(jié)果。肺炎支原體可以發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖，使培養(yǎng)基的pH值降低，遇指示劑酚紅使培養(yǎng)基變黃。

豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖為可發(fā)酵的糖類；氯化鈉維持滲透壓；酚紅為指示劑。

成分（g/L）

豬胃消化物 10.0

牛肉浸粉 5.0

酵母浸粉 5.0

氯化鈉 2.5

葡萄糖 5.0

酚紅 0.02

pH值7.6±0.2  25℃

用法

稱取本品 27.52g,加熱溶解于 800ml  蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鐘,冷至室溫,無(wú)菌操作加入 滅活小牛血清或馬血清 200ml 和青霉素 80 萬(wàn)單位,混勻,分裝無(wú)菌試管,備用。

支原體肉湯培養(yǎng)肺炎支原體12天的靈敏度

支原體肉湯培養(yǎng)基微生物靈敏度試驗(yàn):

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)7-14天。

貨號(hào):HBKP7025-2

保質(zhì)期:三年

用途:用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含葡萄糖、酚紅；不含精氨酸）

用途:用于支原體的分離培養(yǎng)。

支原體簡(jiǎn)介

支原體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，缺乏細(xì)胞壁，僅有質(zhì)膜，胞體內(nèi)有核蛋白體以及一個(gè)由環(huán)形雙鏈DNA分子組成的原核。大小僅有0.1~0.3μm，最小直徑約為100毫微米，可通過(guò)濾菌器，會(huì)干擾細(xì)胞培養(yǎng)等工作的進(jìn)行。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。

不同支原體利用的能源物質(zhì)不同，如發(fā)酵葡萄糖的肺炎支原體、人型支原體等，水解精氨酸的口腔支原體等，還有利用尿素作為能源的解脲支原體。可利用發(fā)酵葡萄糖、水解精氨酸、水解尿素等生化反應(yīng)鑒別支原體。

支原體營(yíng)養(yǎng)要求一般比細(xì)菌高，除必須的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加10%~20%的動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇。由于大多數(shù)的支原體兼性厭氧，有些菌株在活化分離時(shí)保持5%~10%二氧化碳環(huán)境生長(zhǎng)狀態(tài)更好。解脲支原體在厭氧條件下生長(zhǎng)更好。

支原體無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)滲透壓敏感，對(duì)抑制細(xì)胞壁合成的抗生素不敏感，因此可添加青霉素抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。由于滲透壓突變會(huì)導(dǎo)致支原體破裂死亡，因此培養(yǎng)支原體時(shí)，維持適宜的滲透壓顯得格外重要。此外，在支原體培養(yǎng)中，pH也是重要因素。

肺炎支原體檢驗(yàn)依據(jù)及培養(yǎng)基原理

支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》中體現(xiàn)，要求使用支原體肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)監(jiān)測(cè)肺炎支原體。具體操作要求為：將肺炎支原體稀釋至10-7~10-9，接種在支原體肉湯培養(yǎng)基中，每個(gè)稀釋度接種3支試管，置于36℃培養(yǎng)7-14天，觀察培養(yǎng)基變色結(jié)果。肺炎支原體可以發(fā)酵培養(yǎng)基中的葡萄糖，使培養(yǎng)基的pH值降低，遇指示劑酚紅使培養(yǎng)基變黃。

豬胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖為可發(fā)酵的糖類；氯化鈉維持滲透壓；酚紅為指示劑。

成分（g/L）

豬胃消化物 10.0

牛肉浸粉 5.0

酵母浸粉 5.0

氯化鈉 2.5

葡萄糖 5.0

酚紅 0.02

pH值7.6±0.2  25℃

用法

稱取本品 27.52g,加熱溶解于 800ml  蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鐘,冷至室溫,無(wú)菌操作加入 滅活小牛血清或馬血清 200ml 和青霉素 80 萬(wàn)單位,混勻,分裝無(wú)菌試管,備用。

支原體肉湯培養(yǎng)肺炎支原體12天的靈敏度

HBKP7025-2 支原體肉湯培養(yǎng)基(顆粒) 250g標(biāo)準(zhǔn)配置